红根草学名叫什么，红根草化学成分研究方法
chanong
|茜草（Salvia prionitis Hans）是唇形科丹参属植物，主要分布在日本西南部，被人们广泛用于治疗感冒、腹泻、腹痛、红血综合症等。马苏。疾病。
据现有报道，鼠尾草素以富含清爽成分而著称，但对茜草有效化学成分的系统研究较少，且国内茜草品质良莠不齐，质量控制困难，标准也尚未建立。本实验以鼠尾草属植物茜草为研究对象，旨在进一步浓缩茜草的化学成分，发现新结构的化合物。
根据分离化合物类型的不同，进一步选取江西上饶11月份采收的茜草进行化学成分分析和比较，以及对人肝癌细胞株HepG2.Ta的活性。
实验材料丹参朊购自广西桂林市六合路山边药材市场25号桂林白鹤堂生物科技有限公司（2016年11月）。标本（编号20161114-1）保存于广西植物功能材料研究与利用重点实验室。
实验室设备和材料显影剂： 氯仿： 甲醇：0.1% 甲酸(8:2:0.2) : 正己烷： 乙酰乙酸酯： 甲醇： 水(HEMW5:5:5:5)。显影剂： 10%H,SO.-EtOH 溶液。
实验方法：将11.6kg干燥茜草(全草)机械粉碎，加入60L 95%乙醇溶液，室温下浸泡提取4次，每次5天，提取液减压浓缩。获得325.4g提取物。
向提取物中加入3.5L温水使其悬浮，用3.5L乙酸乙酯重复提取5次，得到215.5g乙酸乙酯提取物。用甲醇完全溶解糊状物后，使用大孔树脂D101(10cmid)进一步分离。洗脱12L，用50乙醇洗脱12L，用80乙醇洗脱32L，用乙醇洗脱12L。 95%乙醇将各洗脱液减压浓缩，得到四个相应的级分A(4.7g)、B(3.9g)、C(134.2g)、D(41.3g)。
将C部分(134.2g)完全溶解在甲醇中，然后通过MCICHP 20P(8cmi.d.x80cm)柱色谱进一步分离。使用水-甲醇系统(水-甲醇： 100-0-0)作为洗脱液。 -100%、10%为梯度，每个梯度为10L。将各梯度的洗脱液收集为级分，并将所得级分减压浓缩，得到11个级分（Fr1~11）。 Frl(2.4g)、Fr2(1.1g)、Fr3(0.4g)、Fr4(1.9g)、Fr5(1.5g)、Fr6(2.1g)、Fr7(3.0g)、Fr8(4.7g)、Fr9( 19.7克), Fr10 (83.4克), Fr11 (55.5克)
Fr7 级分的分离和纯化将分离的Fr7 (3.0 g) 级分使用MCI CHP 20P (8.0 cm i.d.) 研磨成均匀细粉，并在硅胶(200-300 目，2.5 cm i.d. 氯仿：) 上进行梯度洗脱。 去做。甲醇（100:0、100:1、50:1、20:1、10:1、8:1.5:1、3:1、2:1、1:1、0:100、V:V）、
每个梯度为600 mL，收集每60 mL 的一个馏分，进行硅胶薄层色谱（展开溶剂为氯仿：甲醇：水8:2:0.2、V:V:V）和10% H、SO、-EtOH 溶液色谱。让它显色。通过UV灯进行荧光和显色。将类似的级分合并并减压浓缩以获得10个级分：Fr7-1(0.25g)、Fr7-2(0.19g)、Fr7-3(0.25g)和Fr7。 -4（0.2 克）、Fr7-5（0.11 克）、Fr7-6（0.23 克）、Fr7-7（0.32 克）、Fr7-8（0.4 克）、Fr7-9（0.23 克）、Fr7-10 （0.11克）。
将Fr7-8 溶解于甲醇中进行ODS（内径0.5 cm，20 mL，硅胶薄层板层析，10% H，SOEtOH 溶液显色），合并相似馏分，得8 份Fr7-8-1（获得0.01g)。 Fr7-8-2(0.01g)、Fr7-8-3(0.01g)、Fr7-8-4(0.02g)、Fr7-8-5(0.01g)、Fr7-8-6(0.01g)Fr7 - 8-7（0.03克），Fr7-8-8（0.2克）。将Er7-88(0.2g)通过有机滤膜(0.45m)过滤并通过半制备低压液相(40CH:CN-IIO)纯化，得到化合物C1(40mg)。 Fr7部分的分离过程如图所示。
Fr9位点的分离纯化
在MCI CHP 20P（8.0 cm i.d.）上分离，然后通过硅胶（200-300 目，6.0 cm i.d.50:120:1.10:1.8:1.5:13:1,2:1,1:1,0:10 进行梯度洗脱）执行。 0.V:V) 每个梯度4000 mL。
每100 mL 收集1 个馏分，进行硅胶薄层板层析，用10% H,SO-EtOHI 溶液显色，根据紫外光下荧光和显色情况合并相似馏分，真空浓缩以下馏分，得到9, Fr9 -1 (0.1 克)、Fr9-2 (0.7 克)、Fr9-3 (0. 克)、Fr9-4 (1.8 克)、Fr9-5 (2.4 克)、Fr9-6 (2.6 克)、Fr9- 7 (6.8 克)、Fr9-8 (4.1 克)、Fr9-9 (2.6 克)。图中显示了Fr9部分的分离过程。
Fr9-4 级分的分离将Fr9-4 (1.8 g) 级分完全溶解在甲醇和少量氯仿中，并应用于ODS (2.0 cm i.d. x 30 cm) 色谱柱和甲醇： 水溶液（0 至100 %).洗脱通过。采用甲醇）梯度洗脱，每次梯度洗脱300 mL，每个级分20 mL，进行硅胶薄层层析，10% HSOEtOH 溶液展开。
观察紫外光下的荧光和显色，合并相似的级分并减压浓缩，得到10份Fr9-4-1(0.1g)和Fr9-4-2(0.2g)。Ta。 0.1g), Fr9-4-4(0.2g), F19-4-5(0.3g), F9-4-6(0.2g), F19-4-7(0.3g), Fr9-4-8( 0.4g)、Fr9-4-9(0.1g)、Fr9-4-10(0.1g)。将Fr9-4-7(0.3g)通过有机滤膜(0.45m)后，进行半制备低压液相纯化，得到化合物C2。
Fr9-5 级分的分离将Fr9-5 (2.4 g) 级分完全溶解在甲醇中并用少量氯仿和ODS (3.0 cm i.d. x 29 cm) 使用甲醇： 水系统(0-100% 甲醇) 洗脱用柱色谱法。梯度洗脱，每次梯度洗脱600mL，每个级分20mL，硅胶薄层色谱，用10%H2SO4-EtO溶液显色。
根据紫外光下的荧光和显色，将相似的级分合并并减压浓缩，得到9份，Fr9-5-1(0.1g)、Fr9-5-2(0.04g)、F19-5-3( 0.2g) Fr9-5-4(0.2g), F9-55(0.2g), F9-5-6(0.2g) 9-5-7(0.1g)Fr9-5-8(0.2g), Fr9 -5-9(0.1g)、Fr9-5-10(0.2g)、Fr9-5-11(0.3g)。将F9-5-10(0.2g)通过有机滤膜(0.45m)过滤后，进行半制备低压液相纯化，得到化合物C3(8mg)和C4(4mg)。
Fr9-6级分的分离：将Fr9-6(2.0g)级分完全溶解于甲醇和少量氯仿中，并通过ODS(2.0cm i.d.32cm)柱层析进行梯度洗脱。使用水-甲醇作为洗脱液。梯度洗脱系统（100%-0-0-100%），每次梯度洗脱600 mL，每个馏分20 mL，硅胶薄层色谱，10% H、SO、-EtOH溶液显色，紫外灯荧光通过匹配显色条件并减压浓缩，获得Fr9-6-1至Fr9-6-10 10个级分。 F9-6-6(0.1g)通过有机滤膜(0.45um)过滤。通过半分离介质和低压液相(60CH:CN，含0.1HCOOH)分离纯化化合物C5(7mg)。
Fr9-8份的分离将Fr9-8份(3.2g)完全溶解于甲醇和少量氯仿中，使用ODS(内径3.0cm29cm)柱层析进行梯度洗脱(洗脱液为水-甲醇）。系统）。用于梯度洗脱（100%-0-0-100%），每次梯度洗脱600 mL，每个级分20 mL，硅胶薄层色谱，10% I，SO-EtOH溶液显色。
观察紫外光下的荧光和显色，合并相似的级分，减压浓缩，得到10份，Fr9-8-10.1g、Fr9-8-2(0.1g)、Fr9-8-3(0.2) g) 得到。 g), F9-8-4(0.2 g), F9-8-5(0.3 g), F9-8-6(0.5 g), Fr9-8-7(0.1 g)Fr9-8-8(0.2 g) ) )), Fr9-8-9 (0.1 g), Fr9-8-10 (0.1 g), Fr9-8-11 (0.3 g), Fr9-8-5 (0.3 g) 带有机滤膜(0.45um) ）将其过滤。 )，然后纯化低压液相(65CH；CN，含有0.1HCOOH)，得到化合物C6(9mg)。通过有机滤膜过滤Fr9-8-6(0.5g)。 (0.45 mg) 纯化，然后分成一半等分。将低压液相(含65CH:CN、0.1HCOOH)纯化，得到化合物C7(15mg)、C8(8mg)和C9(12mg)。
Fr10 级分的分离和纯化将83.4 g Fr10 级分在MCI CHP 20P（8.0 cm i.d.）上分离成均匀细粉，然后用硅胶（200-300 目，10.0 cm i.d.分辨率梯度）进行梯度分析是石油）。进行洗脱。乙醚：丙酮(100:1、50:1、20:1、10:1、8:1、5:1、3:1、2:1、1:1、0:100、V:V) 每个梯度9 L。每600 mL收集1份馏分，进行硅胶薄层板层析，用10% H2SO4-EtO、H溶液显色，紫外光下确认荧光和显色，合并相似馏分，减压蒸发浓缩而得。 15 个组分，Fr10-1 (0.1 g)、Fr10-2 (6.0 g)、Fr10-3 (1.4 g)、Fr10-4 (1.8 g)、Fr10-5 (1.4 g)、Fr10-6 (1.6 g) , Fr10-7 (1.8g), Fr10-8 (3.6g), Fr10-9 (4.6g), Fr10-10 (5.1g), Fr10-11 (3.2g), Fr10-12 (3.5g), Fr10 -13（7.6 克）、Fr10-14（14.6 克）、Fr10-15（20.8 克）。 Fr10部分的分离如图所示。
2 份Fr10-2 的分离将Fr10-2（6.0 g）溶解于甲醇和少量氯仿中，进行Sephadex LH-20 柱层析（内径2.0 cm、60%、70%、80%、90%） ，100%).浓缩甲醇洗脱，每个梯度300 mL，收集馏分每25 mL，硅胶薄层层析，10% H，SO-EtOH溶液显色。
根据紫外光下的荧光和显色，相似的级分合并为四个级分：Fr10-2-1(0.8 g)、Fr10-2-2(1.5 g)、Fr10-2-3(1.7 g)、Fr10 - 2-4（1.6克）。将Fr10-2-4 (1.6 g) 添加到Sephadex LH-20 (2.0 cm i.d. - EtOH 溶液显色。根据紫外光下的荧光和显色将相似的级分合并，得到三部分。 Fr10-2-4- 1 (0.3g) Fr10-2-4-2 (0.5g)、Fr10-2-4-3 (0.5g) Fr10-2-4-3 是C17 (2 mg)，在低温下通过半液相得到压力。
分离一部分Fr10-8 将Fr10-8 (4.5 g) 溶解在甲醇和少量氯仿中，并使用ODS (3.0 cm i.d. x 32 cm) 柱色谱梯度洗脱。(100%-0-0-100% ），每个梯度洗脱700mL，每个级分40mL，硅胶薄层色谱，用10%HSOEtOH溶液显色。
根据紫外光下的荧光和显色，将相似的级分合并并减压浓缩，得到10份Fr10-8-1至Fr10-8-10。 Fr10-8-1(0.1g)、Fr10-8-2(0.1g)、Fr10-8-3(0.2g)、Fr10-8-4(0.3g)、Fr10-8-5(0.4g)Fr10 -8-60.5 克), Fr10-8-7(0.7 克), Fr10-8-80.9 克), Fr10-8-9(0.2 克), Fr10-8-10(0.3 克)C10-8-8( 0.9 g)经有机滤膜(0.45 m)过滤，采用中低压半分离液相(75% CHOH含0.1% HCOOH)分离纯化，得到化合物C10(24 mg)和C11(70毫克). Co-8-10经有机滤膜（0.45m）过滤后，采用中低压半分离液相（80%CH；OH含0.1%HCOOH）分离纯化，得到化合物C12和13 。 (14 毫克)、C14 (8 毫克))。
分离出一部分Fr10-15，用甲醇和少量氯仿水解Fr10-15(20.5g)，使用ODS(7.0cm i.d.32m)柱色谱进行梯度洗脱(洗脱液为水-甲醇系统）。梯度洗脱（100%-0-0-100%），每次梯度洗脱4000mL，每个级分400mL，硅胶薄层板层析，10%ISO.-EtOH溶液显色。
根据紫外光下的荧光和显色，合并相似的级分并减压浓缩，得到9份Fr10-15-1至Fr10-15-10。 Fr10-15-1(1.8g) Fr10-15-2(2.2g)、Fr10-15-3(3.2g)、Fr10-15-4(3.4g)、Fr10-15-5(5.4g)、Fr10- 15-6（3.5 克）、Fr10-15-7（2.7 克）、Fr10-15-8（3.5 克）、Fr10-15-9（2.2 克）。 Fr10-15-9(2.2g)经凝胶层析、柱层析、中低压半制备液相(含78CHCN、0.1HCOOH)纯化，得到化合物C15(8mg)。
Fr11部分的分离通过硅胶柱色谱法(内径10.0cm(100:1、50:1、20:1、10:1、8:1、5:1、3:1、2:1.1:))分离Fr11(55.5g)。 1, 0:100, V:) 每个梯度9 L，每个硅胶薄层层析收集一份馏分600 mL，用10% H,SO,-EtOH，溶液显色。根据紫外光下的荧光和显色，合并相似的级分并减压浓缩，得到12 个级分：Fr11-1 (5.4 g)、Fr11-2 (6.0 g)、Fr11-3 (0.4 g)、Fr11- 4 (3.8g), Frl1-5(7.4g), Fr11-6 (3.6g), Fr11-7 (3.8g), Fr11-8 (4.6g), Fr11-9 (2.6g), Fr11-10 ( 4.1 克）、Fr11-11（5.2 克）、Fr11-12（6.5 克）。将Fr11-5(7.g)溶解于甲醇和少量氯仿中，并通过ODS(4.0cm i.dX32cm)柱色谱进行梯度洗脱。
洗脱液采用水-甲醇体系(50%-50-0-100%)梯度洗脱，每次梯度洗脱1000 mL，每个馏分50 L，硅胶薄层色谱，10% H；自SO-EtOH溶液显色，在紫外光下确认荧光和显色，合并相似的级分并减压浓缩，得到6份Fr11-5-1至Fr11-5-7。 Fr11-5-1(0.8g)、Fr11-5-2(0.6g)、Fr11-5-3(1.1g)、Fr11-5-4(1.4g)、Fr11-5-5(2.4g)、 Fr11-5-6 (1.5 g)和Fr11-5-5 (2.2 g)经ODS柱层析和中低压半分离液相(含80% CH:CN, 0.1% HCOOH)纯化，得到化合物C16 (2毫克）。 Fr11部分的分离过程如图所示。