上海欣协生物科技有限公司，欣生物科技有限公司

大鼠CRP Elisa试剂盒新协生物科技的大鼠CRP ELISA检测试剂盒是用于定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液样品中CRP的专用试剂盒。该套件操作简单，可直接使用。用于样品分析。重现性好，稳定性高。

检测原理：本实验采用双抗体夹心ELISA。当酶板预涂有抗大鼠CRP单克隆抗体并加入适当稀释的样品和标准品时，其中的CRP与单克隆抗体结合，游离成分被洗掉。添加生物素化抗大鼠CRP抗体，抗大鼠。 CRP抗体与单克隆抗体结合的大鼠CRP结合形成免疫复合物，游离成分被洗去；加入辣根过氧化物酶缀合的亲和素，生物素与亲和素特异性结合。洗掉未结合的酶复合物。当反应孔中存在CRP 时，辣根过氧化物酶将无色显色试剂变成蓝色，而当添加终止液时，辣根过氧化物酶将无色显色试剂变成黄色。在450nm处测定OD值时，CRP浓度与OD450值成正比，通过绘制校准曲线即可计算出样品中的CRP浓度。

套件组件

储存条件上面列出的储存条件必须在套件的保质期内。

其他材料1. 酶标仪(450nm) 2. 精密可调移液器和吸头： 0.5-10、2-20、20-200、200-1000 l；使用通道移液器。 3. 自动洗板机或洗瓶机4. 37C 培养箱5. 双蒸水或去离子水、吸水纸、量筒

样品处理和储存方法血清：采血后，使用无热原和内毒素的试管在室温下凝结30 分钟并以1000 g 离心10 分钟，小心分离血清。血浆：使用EDTA、柠檬酸盐和肝素作为抗凝剂收集血浆，并在收集后30 分钟内以1000 x g 离心15 分钟以去除颗粒。细胞上清液：以1000 x g 离心10 分钟以去除颗粒和聚合物。储存：如果不立即检测样品，请将其等分成单剂量并储存在-20C至-70C，以避免反复冻融。避免使用溶血或高脂血症样品。如果血清中含有大量颗粒，测试前应离心或过滤除去颗粒，并在室温下解冻，解冻温度不要超过37。稀释：标本可根据实际情况适当稀释（建议通过初步实验确定稀释倍数）。注意：我们建议用1:2 稀释正常人血清或血浆样品。

操作步骤1. 按照上述准备工作配制各种溶液。 2、根据待测样品和标准品的数量确定所需条数，并添加1个孔作为空白对照孔。将不同浓度的分析物和标准品（100 l/孔）添加到相应孔中（仅将标准品/样品稀释液添加到零孔），用密封胶带密封反应孔，并在37培养箱中孵育90分钟.马苏。 3. 洗板4次。 (1)自动洗板机：需要350l洗板液，进样和吸样间隔15-30秒。 (2)手动洗板：甩掉孔内液体，每孔加入350l洗板液，放置30秒，甩掉液体，在厚吸水纸上拍干。 4. 添加生物素化抗体工作液（100l/孔）。用密封胶带密封反应孔并在37C 培养箱中孵育60 分钟。 5. 洗板4次。 6. 添加酶结合物工作液（100l/孔）。用密封胶带密封反应孔并在37C 培养箱中孵育30 分钟。 7. 洗板4 次。 8. 每孔加入100 l 显色剂，并在37C 培养箱中避光孵育8-20 分钟。 9. 每孔加入100l终止液，混匀后立即（5分钟内）测定OD450值。注：仅将颜色试剂和终止溶液添加到空白对照孔中。当使用450nm/630nm双波长读数时，无需进行空白对照。 OD值=OD450~OD630。

判断结果1、孔的外径值减去各标准品和试件的外径值，如有重复孔，计算平均值。 2. 使用计算机软件，以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的CRP标准浓度为横坐标（X），制作相应的标准曲线（采用四参数曲线拟合）。将标准曲线上的OD值换算成相应的浓度即可计算出样品的CRP含量。 3. 如果样品的OD值超过标准曲线上限，则将样品适当稀释后重新测试，并在计算浓度时将样品含量乘以稀释倍数。 4、参考数据：（数据仅供参考，最佳显色时间因用户而异）

结果板间和板内重现性变异系数均为