培养基的配制与环境中微生物的检测，三种常见微生物的常用培养基配方

1、牛肉膏蛋白胨培养基（细菌培养用） 牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，pH 7.4-7.6。

2. 高氏1号培养基（放线菌培养用） 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4·3H2O 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，水1000mL，pH 7.4~7.6。制备注意事项：可溶性淀粉在加入上述培养基之前必须与冷水充分混合。 3.马丁培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g、MgSO4·7H2O0.5g、蛋白胨5g、葡萄糖10g、1/3000孟加拉红水溶液100mL、水900mL、自然pH、30湿热灭菌菌于121分钟。待培养基解冻并冷却至55~60后，加入链霉素（链霉素含量为30 g/mL）。 4. 马铃薯培养基（PDA）（用于霉菌或酵母培养） 200g 马铃薯（去皮）、20g 蔗糖（或葡萄糖）、1000mL 水准备如下：马铃薯去皮，加入约2cm2 的块。倒入1500mL烧杯中，煮沸30分钟，用玻璃棒搅拌，防止粘底，然后用双层纱布过滤，滤液中加糖，配制成1000mL，使用天然pH值酵母，用蔗糖为霉菌葡萄糖。炭培养基（蔗糖硝酸钠培养基）（霉菌培养用） 蔗糖30g、NaNO3 2g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g、KCl 0.5g、FeSO4·7H2O 0.1g、水1000mL、pH7.0-7.2 6 Hayflick 培养基（用于支原体培养）牛心消化物（或渗出液）1000 mL、蛋白胨10 g、氯化钠5 g、琼脂15 g，pH 7.8-8.0，每瓶70 mL，121湿热灭菌15 分钟待冷却至80左右，然后加入20 mL马血清、10 mL 25%活酵母提取物、2.5 mL醋酸铊15水溶液、0.5 mL青霉素G钾盐溶液（20万以上）。单位）至每个70 mL，混合并倒入板中。 *注意：醋酸铊是一种剧毒药物，需要特别小心才能安全处理。 7. McCrary培养基（乙酸钠培养基）葡萄糖0.1g，KCl 0.18g，酵母提取物0.25g，乙酸钠0.82g，琼脂1.5g，蒸馏水100mL。溶解后分装于试管中，115湿热灭菌15分钟。 8、葡萄糖蛋白胨水介质（用于V.P.反应和甲基红试验） 蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g，K2HPO4 0.2g，水100mL，pH 7.2，1L 5湿热灭菌20分钟。 9、蛋白胨水介质（用于吲哚试验） 蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，pH 7.2-7.4，121湿热灭菌20分钟。 10、糖发酵培养基（用于细菌糖发酵试验） 蛋白胨0.2g，氯化钠0.5g，K2HPO4 0.02g，水100mL，溴百里酚蓝（1%水溶液）0.3mL，糖1g。称取蛋白胨和氯化钠于沸水中溶解并调节pH至7.4后，加入溴百里酚蓝（溶于少量95%乙醇，然后加水配成1%的水溶液），加糖，分成试管，填充至4-5厘米高度，倒入杜氏管中（管口朝下，在管中填充培养基）。 115湿热灭菌20分钟。灭菌时应注意适当延长煮沸时间，并尽可能排出冷空气，以免杜氏小管内留下气泡。常用的糖类有葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖（后两种糖的用量常增加至1.5%）。 11. RCM培养基（富集梭状芽胞杆菌培养基）、（用于厌氧细菌培养）酵母抽提物3g、牛肉膏10g、蛋白胨10g、可溶性淀粉1g、葡萄糖5g、盐酸半胱氨酸0.5g、氯化钠3克，醋酸钠3克，水1000毫升，pH 8.5，刃天青3mg/L，121湿热灭菌30分钟。 12.TYA培养基（厌氧菌培养用） 葡萄糖40g、牛肉提取物2g、酵母提取物2g、胰蛋白胨（Bactotypicton）6g、醋酸铵3g、KH2PO4 0.5g、MgSO4·7H2O 0.2g、FeSO4·7H2O0 .01g、1000mL 水pH值为6.5，121湿热灭菌30分钟。 13、玉米醪培养基（培养厌氧菌）：玉米粉65克，自来水1000毫升，搅拌均匀，煮沸10分钟成糊状，调至自然pH，121湿热灭菌30分钟。马苏。

14. 中性红培养基（厌氧菌培养用） 葡萄糖40g、胰蛋白胨6g、酵母提取物2g、牛肉提取物2g、醋酸铵3g、KH2PO4 5g、中性红0.2g、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O 0.01g、水1000mL、 pH6 .2，121湿热灭菌30分钟。 15、CaCO3明胶麦芽汁培养基（厌氧菌培养用）麦芽汁（6波美度）1000mL，水1000mL，CaCO3 10g，明胶10g，pH 6.8，121湿热灭菌30分钟。 16、BCG牛奶培养基（乳酸发酵用）（A）溶液：将1mL 1.6%溴甲酚绿（B.C.G）乙醇溶液加入100g脱脂奶粉和500mL水中，80灭菌20分钟。 (B)溶液：10g酵母抽提物，500mL水，20g琼脂，pH 6.8，121湿热灭菌20分钟。在无菌技术下趁热将溶液(A) 和(B) 混合均匀并倒入盘中。 17、乳酸菌培养基（乳酸发酵用） 牛肉膏5g，酵母膏5g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，乳糖5g，氯化钠5g，水1000mL，pH 6.8，121湿热灭菌20分钟。 18、酒精发酵培养基（酒精发酵用）蔗糖10g、MgSO4·7H2O 0.5g、NH4NO30.5g、20%豆芽汁2mL、KH2PO4 0.5g、水100mL、自然pH。 19、Kossoff培养基（钩端螺旋体培养用）优质蛋白胨0.4g，NaCl 0.7g，KCl 0.02g，NaHCO3 0.01g，CaCl 0.02g，KH2PO4 0.09g，NaH2PO4 0.48g，蒸馏水500mL，无菌兔血清40mL。制备方法：将除兔血清外的其余成分混合，加热溶解，调pH至7.2，121湿热灭菌20分钟，冷却，加入灭菌兔血清制成8%血清溶液，测试。分装于管中（5-10mL/瓶），56水浴灭活1小时，静置。 20、豆芽汤培养基：加入豆芽500克，水1000毫升，煮沸1小时，过滤，补水，121灭菌，备用。这是50%的豆芽汤。细菌培养：10%豆芽汁200mL，葡萄糖（或蔗糖）50g，水800mL，pH 7.2-7.4。用于霉菌或酵母培养：200mL 10%豆芽汁，50g糖，800mL水，自然pH。霉菌使用蔗糖，酵母使用葡萄糖。 21. LB（Luria-Bertani）培养基（细菌培养，分子生物学中常用） 950 mL 双蒸水，10 g 胰蛋白胨，10 g NaCl，5 g 乳酸菌提取物，1 mol/L NaOH（约1 mL)调节pH值至7.0，加双蒸水定容至1L，121湿热灭菌30分钟。含氨苄青霉素的LB培养基：LB培养基灭菌后，冷却至约50，添加抗生素至终浓度80100mg/L。 22、品红亚硫酸钠培养基（Endo培养基）蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏5g，琼脂20g，乳糖10g，K2HPO 40.5g，无水亚硫酸钠5g，5%碱性品红乙醇溶液20mL，蒸馏水1000mL。制作过程：首先将蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、琼脂加入900mL水中，加热溶解，然后加入K2PO4，溶解后加水至1000mL，调节pH至7.2-7.4。然后加入乳糖，混合溶解，115湿热灭菌20分钟。接下来，称取亚硫酸钠放入无菌空试管中，溶于少量无菌水中，水浴煮沸10分钟，立即滴加到20mL 5%碱性紫红色乙醇溶液中，直至变深红.马苏.直到变成浅粉色。将上述灭菌培养基以溶解状态加入，混匀后立即倒入盘中，待凝固后放入冰箱保存，颜色由浅红色变为深红色时即可使用。红色，不能再使用。

23. 乳蛋白胨半固体培养基（用于测定水中大肠菌群） 蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏5g，乳糖10g，琼脂5g，蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4，分装于试管中（10mL/瓶） ）并在115C湿热灭菌20分钟。 24、乳蛋白胨培养基（多管发酵法检测水中大肠菌群用） 蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳糖5g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL。调节pH至7.2，分装至试管（10mL/管）中，置于反向杜兴管中，15湿热灭菌20分钟。 25、3倍浓缩乳蛋白胨培养液（用于测定水中大肠菌群） 将乳蛋白胨培养液各营养成分加入1000mL水中，稀释3倍（制备方法同上）。各倒入试管中，115湿热灭菌20分钟。 26. 曙红亚甲蓝培养基（EMB 培养基）（用于水中大肠菌群测定和细菌转导） 蛋白胨10g，乳糖10g，K2HPO4 2g，琼脂25g，2%/eosin Y（曙红）水溶液20mL，0.5%亚甲蓝（亚甲基蓝）水溶液13 mL，pH 7.4。制作过程：将蛋白胨、乳糖、K2HPO4、琼脂混合，加热溶解，调pH至7.4，115湿热灭菌20分钟，加入分别灭菌的伊红溶液和亚甲蓝溶液，加入防腐剂，混匀。没有将会形成气泡。当介质冷却至50C 左右时，将其倒入平板中。如果介质太热并产生过多的冷凝物，可以让板凝固，然后倒置存放在冰箱中以备后用。在细菌转导实验中，用半乳糖代替乳糖，其他成分保持不变。 27. 双肉汤培养基（细菌导入） 牛肉膏6g，蛋白胨20g，氯化钠10g，水1000mL，pH 7.4-7.6 28. 半固体琼脂（细菌导入） 琼脂1g，水100mL，121湿热灭菌30分钟。 29、豆粉斜面培养基（用于筛选产蛋白酶菌株） 100g豆粉加水56倍，煮沸滤液100mL，加入0.1%KH2PO4、0.05%MgSO4、0.05%（NH4） )2SO4。 ，可溶性淀粉2，pH 6，琼脂2至2.5。 30、在酪蛋白培养基（用于筛选蛋白酶菌株）中配制A液和B液。液体A：称取1.07 克Na2HPO4·7H2O。将4g酪蛋白加入适量蒸馏水，加热溶解。 B液：称取KH2PO4 0.36g，加水溶解。将A液和B液混合后，加入0.3mL酪蛋白水解物和20g琼脂，最后用蒸馏水定容至1000mL。酪蛋白水解液的制备：将1g酪蛋白溶解于碱性缓冲液中，加入25mL 1%枯草芽孢杆菌，加水定容至100mL，30水解1小时。用于配制培养基时，用量为1000mL，超过100mL时将水解液加入培养基中。 31、细菌基础培养基（用于营养缺陷型细菌筛选）Na2HPO4·7H2O1g、MgSO4·7H2O0.2g、葡萄糖5g、NaCl 5g、K2HPO4lg、水1000mL、pH7.0、115湿热灭菌30分钟。 32、YEPD培养基（酵母原生质体融合用） 酵母粉10 g，蛋白胨20 g，葡萄糖20 g，蒸馏水1000 mL，pH 6.0，115湿热灭菌20分钟。 33.YEPD高渗培养基（用于酵母原生质体融合） 在YEPD培养基中加入0.6mol/L NaCL和3%琼脂。 34. YNB基本培养基（用于酵母原生质体融合）0.67%酵母氮基（YNB，无氨基酸，Difco），2%葡萄糖，3%琼脂，pH 6.2。替代配方：葡萄糖10g（NH4）2SO4 1g、K2HPO40.125g、KHPO4 0.875g、KI 0.0001g、MgSO4·7H2O 0.5g、CaCl2·2H2O 0.1g、NaCl 0.1g、维元素储备液1mL、维生素储备液1mL（母液） ) 35. YNB高渗基础培养基（用于原生质体融合） 在YNB基础培养基中添加0.6 mol/L NaCl。 36、酚红半固体柱状培养基（用于考察氧气与细菌生长的关系） 蛋白胨1g，葡萄糖10g，玉米浆10g，琼脂7g，水1000mL，pH 7.2。

调节pH后，加入数滴1.6%酚红溶液，直至培养基变成深红色，将试管高度约1/2分成较大的试管，1l5灭菌。 20 分钟。细菌在这种培养基中利用葡萄糖生长并产生酸，使酚红从红色变成黄色。当细菌在培养基的不同部分生长时，培养基相应部分的颜色会发生变化。如果时间太长，酸可能会扩散而失效，因此请正确判断结果。上述各种培养基只需改变琼脂用量即可制成固体或半固体，前者为1.52.0，后者为0.30.8。