呼吸道4种病毒抗原检测，呼吸道病原体抗原三项检测

随着检验科室新检测项目的不断开展，多项气道检测在越来越多的医院普及，套餐组合使得临床呼吸道感染的检测变得更加高效、特异、全面。肺炎衣原体是20世纪80年代发现的一种新的非典型病原体，是急性呼吸道感染的最常见原因。可引起肺炎、支气管炎、咽炎，以及动脉粥样硬化、心内膜炎、冠心病等肺外疾病。严重时会造成损坏。它感染人体的多个系统和器官。也是全球常见社区获得性肺炎的主要病原体之一。幼儿和老年人是易感人群，临床表现为轻度或无症状感染。这给临床诊断带来了巨大的压力，因此临床诊断需要实验室检测的支持来确定感染类型，这在临床用药和疾病管理中发挥着重要作用。

（一）肺炎衣原体简介肺炎衣原体（Cpn）是一种细胞内寄生的革兰氏阴性菌。1965年从台湾一名儿童的结膜中分离出第一株Cpn菌株（TW-183），1989年分离出Cpn和Cpn是从台湾一名儿童的结膜中分离出来的，被命名为衣原体属新种。肺炎衣原体具有独特的生命周期。初生体（EB）感染宿主细胞后，发育成代谢活跃的网状体（RB），然后进行二元裂变，再生大量EB。这些EB在细胞破裂后被释放并继续感染新的宿主细胞。外膜蛋白复合物是肺炎衣原体的主要保护蛋白，包括三种类型：主要外膜蛋白（MOMP，也称为外膜蛋白A）、富含半胱氨酸的大蛋白和富含半胱氨酸的小蛋白。其中，MOMP存在于EB和RB中，约占外膜蛋白总量的60%。富含半胱氨酸的外膜蛋白2 (OMP2)：衣原体外膜复合物的结构蛋白。它具有属特异性，是主要的抗原表位之一。脂多糖（LPS）：衣原体细胞壁。组成部分之一。 （内毒素）具有抗原表位。

图1：衣原体细胞壁结构示意图。

（二）对肺炎衣原体的免疫反应1）免疫反应与菌株对肺炎衣原体各菌株的蛋白谱进行检测时发现，虽然菌株间存在细微差异，但所有菌株均含有39.5kDa的条带蛋白。可以看到有。所有患者血清均引发针对其的免疫反应。

图2：参与不同肺炎衣原体菌株免疫反应的蛋白质。

2）肺炎衣原体的血清学动态，机体感染肺炎衣原体后，IgM在2-3周出现，4-5周达到高峰，3-5个月后下降；IgG在初次感染后30天内上升。它开始并在3-4个月后达到顶峰。

图3：肺炎衣原体的血清学动态

3）肺炎衣原体感染患者血清中参与免疫反应的抗原位点。参与免疫反应的抗原位点为8/10kDa、15kDa、40kDa、43kDa、46kDa、53kDa、60/62kDa、70kDa，因此多重抗原刺激是肺炎衣原体感染过程中的主要因素。已证明。

图4：肺炎衣原体感染患者的抗原蛋白谱。

进一步分析肺炎衣原体感染过程中的抗体谱表明，感染早期、感染中期、感染晚期参与免疫应答过程的主要抗原位点是：I /99kDa、60/62kDa、40kDa、27kDa 和15kDa；这与触发肺炎衣原体免疫反应的主要抗原位点一致。 OMP4和OMP5蛋白：97/99kDa；OMP2蛋白：60/62kDa；MOMP蛋白：40kDa；OMP3蛋白：15kDa；这些结果表明，多种抗原参与肺炎支原体感染任何阶段的免疫反应。检测肺炎衣原体感染的包被抗原必须含有多个表位，特别是重要的表位，如OMP2蛋白、OMP3蛋白、OMP4蛋白、OMP5蛋白、MOMP蛋白等。是的，天然蛋白是最好的选择。

图5：肺炎衣原体感染期间的抗体谱

图5：肺炎衣原体感染期间的抗体谱

单克隆抗体对相应40kDa（MOMP）抗原位点的识别表明，肺炎衣原体单克隆抗体无法识别纯化的线性抗原，即不产生特异性结合并发生构象变化。这导致患者血清反应性弱或无反应性。反应性；表明MOMP 的构象表位是该抗原位点的主要识别目标。生物合成的天然40kDa MOMP被肺炎衣原体感染患者的血清识别，比线性蛋白识别更敏感。 MOMP抗原的选择表明其天然抗原优于线性表位抗原。

图6：不同来源的MOMP抗原与肺炎衣原体单克隆抗体之间的反应。

德国乌尔姆大学的Jrgen Benjamin Hagemann 及其同事进行的一项研究表明，肺炎衣原体患者血清中的IgM 和IgG 会引发针对表面相关蛋白、毒力相关蛋白和其他假设相关蛋白的免疫反应。已被证明。肺炎衣原体的所有相关蛋白抗原位点对IgM 和IgG 均表现出非常高的敏感性和特异性。

图7：肺炎衣原体IgM和IgG抗体与肺炎衣原体的反应。

图7：肺炎衣原体IgM和IgG抗体与肺炎衣原体的反应。

摘要：国际上对肺炎衣原体感染免疫反应的研究表明，血清学检测方法中使用的主要抗原是肺炎衣原体全细菌抗原和属抗原（主要外膜蛋白复合物和脂多糖），并已被广泛应用。被证明是衣原体的天然抗原。肺炎是肺炎衣原体。抗体测试的理想选择。

（三）小结疫情后时期，呼吸道病毒综合征的检测将对预防呼吸道疾病的社区传播、医院感染的防控发挥重要作用。了解肺炎衣原体的免疫反应和血清动力学以及肺炎衣原体天然抗原是快速、准确开展肺炎衣原体抗体检测的可靠保证。注：如对文章有任何疑问，请联系作者邮箱：hillson.zhu@virion-serion.net

参考文献： [1] 肺炎衣原体诊断： 关于采样时间的方法学的重要性[2] 对重组肺炎衣原体抗原的体液免疫反应的分析[3] 通过免疫印迹和免疫沉淀分析对肺炎衣原体的体液免疫反应分析[4] 肺炎衣原体的分子分析抗原性肺炎衣原体菌株及其分子分析[5] 人类肺炎衣原体种特异性蛋白的表征