小胶质细胞具有保持内环境稳定免疫功能，小胶质细胞用什么培养基
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|小胶质细胞在脑实质内充当巨噬细胞，并对细胞因子和来自周围的各种刺激做出反应。此外，这些细胞在修剪神经回路中发挥着既定的作用，小胶质细胞损伤会导致大脑连接和行为功能�**Ｈ欢〗褐氏赴⒒拥娜非凶饔靡约罢庑┫赴绾蜗煊γ庖叩鹘谥档媒徊窖芯俊Ｆ咸蜒揽朴⒉祭笱窬蒲Ш拖赴镅е行牡腇rauke Zipp、Ana Lusa Cardoso 和Joo Pea 合作发表了论文《IL-4 在产后发育过程中塑造小胶质细胞依赖性修剪》。第一。2023 年《Neuron》“机制揭示了小胶质细胞在小脑成熟的关键神经免疫阶段中IL-4 的修剪作用，并深入了解人类过敏性疾病和注意力缺陷多动�**�(ADHD) 的共病”摘要：1. IL在小脑成熟的神经免疫关键期，-4 水平较低2. 过量的IL-4 会阻止小胶质细胞对颗粒细胞的生理修剪3. 过量的颗粒细胞具有兴奋性增加对浦肯野细胞的输入驱动4. 早期过敏性生活会导致类似ADHD 的多动症1. 小脑和小胶质细胞的成熟在出生后同时发生评估小脑成熟和小胶质细胞形态的相关变化。Rosa26-STOP-tdTomato (tdT) 报告菌株(Ai9 小鼠) 与PV-Cre 菌株一起使用产生PV:tdT小鼠。小胶质细胞的形态随着时间的推移而变化，并根据皮质水平进一步分支。这些数据表明，随着小脑皮质的成熟，小胶质细胞逐渐发展出分支的监视样表型。2.小脑IL-4水平与小胶质细胞介导的神经元修剪呈负相关，以评估小胶质细胞是否积极参与小脑皮质重塑。为此，研究人员使用了来自PV:tdT 小鼠小脑的神经元。细胞计数和共聚焦显微镜显示，小胶质细胞的比例与小胶质细胞介导的神经元修剪呈负相关。内化tdT 表达（tdT 小胶质细胞）在P10 时最高。被发现在生命第二周下降，并从P30 持续到P60，达到约5% tdT 小胶质细胞的稳定状态，有趣的是，作者发现，显着浓度我们观察到tdT 与小胶质细胞比例呈负相关。为了确定IL-4 是否影响小胶质细胞介导的神经修剪，作者通过腹腔注射重组细胞因子和同时研究了IL-4 水平的早期增加。分析了小脑胶质细胞的吞噬作用。在这项研究中，小脑小胶质细胞表现出高吞噬表型，LPS进一步增强了这种表型。虽然没有增强，但IL-4被发现能够降低吞噬作用，再次表明出生后小脑小胶质细胞表现出一种高清除率、高吞噬表型。通过荧光共聚焦发现，IL-4 可以影响小脑多层的GC 修剪。 （图1）
图1. IL-4 在小脑成熟过程中对小胶质细胞介导的神经元物质吞噬作用产生负面影响3. IL-4 水平升高引起的电生理变化IL-4 是在小脑微电路中产生的为了从功能上评估是否检测到小脑蠕虫PC，研究人员记录了P10、P15 和P30 时小脑蠕虫PC 内的微尺度兴奋性突触后电流(mEPSC)。该分析显示p10 时mEPSC 事件的频率增加，表明PC 上的兴奋性连接增加。有趣的是，与流式细胞术数据一致，在后期（P13或P28）注射IL-4并没有导致兴奋性突触连接的明显变化，再次表明出生后发育的早期关键期。建议。流式细胞术和电生理学数据表明，小胶质细胞介导的吞噬作用的缺陷与突触接触数量的增加和/或逃避修剪的GC数量的增加相一致，这些结果显示用IL-4治疗的P10动物的存活率。 神经元数量增加。 （图2）
图2. 出生后第二周注射IL-4 会引起浦肯野细胞兴奋性输入的长期变化。 4. IL-4升高后小鼠的行为特征评估认知、运动、社交和情绪行为的测试表明，用IL-4治疗的小鼠表现出总行走距离增加；在中枢处花费的时间没有变化。开放区域。结果显示，社交行为、记忆、焦虑样行为、大理石埋藏或筑巢行为没有显着变化。在旋转测试中，这些动物跌倒所需的时间较短，但运动学**没有显着变化。当通过轮跑活动评估时，IL-4治疗的小鼠表现出运动过度表型。此外，这些动物表现出更多的普遍刻板印象和重复行为。最后，在T 迷宫测试中，注射IL-4 的小鼠更喜欢立即低奖励，这与冲动表型一致。总而言之，这些数据表明，产后第二周内高水平的IL-4 会导致ADHD 的多动和冲动样行为。 （图3）
图3. 在生命第二周注射IL-4 会诱导小脑依赖性行为缺陷和ADHD 样表型。5. 早期产后过敏性哮喘模型的表型分析。此外，作者还建立了早期过敏性哮喘小鼠模型哮喘并评估了这种早期Tp 超敏反应对P60 小脑回路功能和行为的长期影响。与注射IL-4 的小鼠类似，作者观察到PC 上mEPSC 的频率出现了预期的增加。在评估运动行为的变化时，过敏性哮喘小鼠模型在旷场和轮跑测试中也表现出过度活跃。 （图4）
图4. 出生后过敏性哮喘减少小胶质细胞介导的神经元吞噬作用并增加小脑颗粒细胞密度。6. Tp 攻击小鼠小胶质细胞中IL-4 受体信号的消除。检查小鼠的类似行为以分析IL-4 的贡献信号传导方面，作者使用了与Cx3cr1-CreER 小鼠杂交的Il4r FL/FL 小鼠。这些数据表明，小胶质细胞会驱动由最初的异常Tp 挑战引起的ADHD 样多动症。 （图5）
图5. 条件性小胶质细胞Il4r 缺陷的小鼠在给予IL-4 和出生后过敏性哮喘后不会表现出ADHD 样多动症。研究和其他实验提供了神经免疫功能�**统錾笮∧苑⒂斐Ｖ湟蚬叵档闹ぞ荨Ｕ庀钛芯壳康餍枰徊搅私饣肪诚嗷プ饔萌绾蔚鹘诔錾蟠竽苑⒂捌溆肷窬窈蜕窬⒂**墓叵怠�
原文链接：https://doi.org/10.1016/j.neuron.2023.09.031 参考文献Guedes JR, Ferreira PA, Costa J, Laranjo M, Pinto MJ, Reis T, Cardoso AM, Lebre C, Casquinha M, Gomes M, Shkatova V, Pereira M、Beltro N、Hanuscheck N、Greenhalgh AD、Vogelaar CF、Carvalho AL、Zipp F、Cardoso AL、Pea J. IL-4 在出生后发育过程中形成小胶质细胞依赖性修剪。 Neuron. 2023年11月1日；111(21):3435-3449.e8.doi: 10.1016/j.neuron.2023.09.031.PMID: 37918358.编辑：南星（脑新闻主创团队）校对：Simon（脑新闻编辑部）