固体石蜡 化妆品微生物检验项目及流程总结，保障消费者健康安全

化妆品微生物检测项目

1.菌落总数：化妆品样品经处理后，在一定条件下（如培养基组成、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等）培养后，1g（1mL）所含菌落总数。所得结果仅包括在本方法规定的条件下生长的中性嗜氧菌落总数和兼性厌氧菌落总数。

2、霉菌、酵母菌总数：将化妆品样品在一定条件下进行培养后，测定1g或1mL化妆品中所污染的活霉菌和酵母菌的数量，以判断化妆品受霉菌和酵母菌污染的程度及其总体卫生状况。

3.耐热大肠杆菌：一类需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，在44.5℃培养24～48小时后能发酵乳糖产酸产气。

4、金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄状，无芽孢、无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。

5、绿脓杆菌：属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓素，此外能液化明胶，将硝酸盐还原为亚硝酸盐，生长温度为42℃±1℃。

化妆品微生物检测标准

2007年版《化妆品卫生规范》规定，生产过程中的半成品储存间、灌装间、洁净容器储存间、更衣间的空气中眼部化妆品、用于唇部等黏膜部位的化妆品、婴幼儿及儿童化妆品菌落总数应≤/立方米；灌装间工作台表面细菌菌落总数应≤20cfu/平方米，工人手表面细菌菌落总数应≤/手，且不得检出致病菌。

化妆品微生物检测流程

化妆品微生物检验按照2015年版《化妆品安全技术规范》第5章微生物检验方法进行。

微生物检验方法通则

1 范围

本部分规定了化妆品微生物检测的基本要求。

本部分适用于化妆品检验样品的采集、贮存和制备。

2 仪器设备

2.1天平：0～200g，精确至0.1g。

2.2 高压灭菌器。

2.3 振荡器。

2.4 锥形瓶:250mL、150mL。

2.5 玻璃珠。

2.6 玻璃棒。

2.7 无菌刻度吸量管：10mL、1mL。

2.8 恒温水浴。

2.9 均质机或研钵。

2.10 对均质袋进行灭菌。

3 培养基和试剂

3.1 生理盐水

配料：氯化钠 8.5g

加入蒸馏水

制法：溶解后，分装于加有玻璃珠的三角瓶中，每瓶90mL，121℃灭菌20分钟。

3.2 SCDLP液体培养基

配料表：酪蛋白胨 17g

大豆蛋白胨 3g

氯化钠 5g

磷酸氢钾 2.5g

葡萄糖 2.5g

卵磷脂 1g

吐温 80 7g

蒸馏水

制法：先将卵磷脂加热溶解于少量蒸馏水中，然后与其他成分混合，加热溶解，调节pH值。

7.2~7.3，每瓶90mL，121℃灭菌20min，注意振摇，使吐温80沉淀于瓶底

搅拌均匀，冷却至25℃左右即可使用。

注：如果没有酪蛋白胨、大豆蛋白胨，可用聚蛋白胨代替。

3.3 灭菌液体石蜡。

制法：取液体石蜡50mL，121℃高压灭菌20分钟。

3.4 灭菌吐温80。

配制方法：取吐温，121℃高压灭菌20min。

4. 样品采集及注意事项

4.1 所采集样品应具有代表性。一般应根据每批化妆品的大小随机抽取相应数量的包装。

检测时，应从不少于2个包装单元中取10g或10mL样品。

对于产品，抽样时可适当增加样品包装数量。

4.2 待测样品应保存在原包装内，容器不得破碎，测试前不得打开，以防止样品

产品已被污染。

4.3 收到样品后，应立即登记，写明检验流水号，并按照检验要求尽快进行检验。

样品应保存在室温下阴凉干燥处，不得冷藏或冷冻。

4.4 如果只有一个样品，而需要同时进行多项分析，如微生物学、毒理学、化学等，建议先取出部分样品。

进行微生物学测试，然后将剩余的样品送去进行其他分析。

4.5 在检验过程中，从打开包装到所有检验操作完成，必须防止微生物的再次污染和扩散。

所有器具和材料都应提前消毒，所有操作都应在符合生物安全要求的实验室内进行。

5 试验样品的制备

5.1 液体样品

5.1.1 水溶性液体样品:用无菌吸量管吸取10 mL样品,加入90 mL无菌生理盐水中,混匀。

然后，准备 1:10 的测试溶液。

5.1.2 油性液体样品:取10g样品,加入5mL无菌液体石蜡混匀,再加入10mL无菌吐温

80，在40℃~44℃水浴中振摇混匀10分钟固体石蜡，加入75mL无菌生理盐水（在40℃~44℃水浴中）

预热混合物，并在40℃~44℃水浴中乳化，制成1：10的悬浮液。

5.2 软膏、乳膏和乳剂的半固体样品

5.2.1 亲水样品:称取10 g,加入含有玻璃珠和90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中。

旋涡混匀，静置15分钟，取上清液作为1:10的供试品溶液。

5.2.2 疏水性样品:称取10 g,置于无菌研钵中,加入10 mL无菌液体石蜡,研磨成粘稠状态,

加入10 mL无菌Tween 80，研磨至溶解，加入70 mL无菌生理盐水，在40-44℃水浴中加热。

将二者混合成1：10的测试溶液。

5.3 固体样品

称取10g，加入90mL无菌生理盐水中，充分摇匀，使其分散悬浮，静置后取

以1:10的稀释度取澄清溶液作为供试品溶液。

使用均质机时，用已灭菌的均质袋，加入10g上述水溶性软膏、霜剂、散剂等。

90mL无菌生理盐水，均质1min~2min；对于疏水性软膏、霜剂、眉笔、口红等，称取10g样品，加入10mL

无菌液体石蜡，10mL吐温80，70mL无菌生理盐水，均质3min～5min。